Evaluating the Seeding Potential of Food Derived Protein Nanofibrils in Alpha Synuclein Aggregation

Sammanfattning

Syftet med denna studie var att karaktärisera aggregeringsbeteendet hos alfa synuklein och utvärdera effekterna av protein nano fibriller (PNF) gjorda från livsmedelsprotein. Aggregeringen av alfa synuklein undersöktes vid olika koncentration och visade att 70 µM var den optimala koncentrationen för aggregering, eftersom denna gav den högsta intensiteten i thioflavin T (ThT) fluorescens. Vid 60 µM var aggregerings intensiteten signifikant lägre än vid 70 µM, men fortfarande högre än 75 µM, vilket indikerar en koncentrations beroende aggregationsprofil med en tydlig topp vid 70 µM. PNF från vassleprotein isolat, favaböns proteinisolat och lysozym framställdes framgångsrikt, vilket huvudsakligen bekräftades genom ThT fluorescens analyser, dialys och gelering (i fallet med vassle). En betydande observation var att alfa synuklein aggregerade omedelbart vid kontakt med fava proteinet. Detta tyder på närvaro av redan bildade beta sheet strukturer som kan fungera som frön för alfa synuklein aggregering. Denna effekt stöder hypotesen att fibrillära mat proteiner kan påskynda aggregerings kinetiken genom att öka nukleations ställen. I försöket med vassleprotein isolat PNF påverkades alfa synuklein aggregeringen inte, oavsett initial koncentration eller fibrillmorfologi. Trots variationer i fibrillernas krökning och koncentrationer påverkades inte aggregeringen, vilket tyder på låg strukturell kompatibilitet med alfa synukleinets fibrillationsvägar. Däremot visade lysozym PNF en tydlig påskyndande av alfa synuklein aggregering med cirka 25% vilket motsvarar 15 timmar jämfört med icke fröande replikat. Resultaten understryker specifiteten i fröningsinteraktioner och lyfter fram lysozymfibrillernas potentiella roll i att modulera alfa synuklein aggregaringskinetik.